Материал для исследования: кровь.
Лабораторная диагностика вирусных гепатитов.
Показатели:
1.Маркеры вирусного гепатита А (НАV)
- Анти-НАV IgM - антитела к вирусу гапатита А появляются в сыворотке крови в конце инкубационного периода к началу клин.проявлений и сохраняются в сыворотке крови до 6 месяцев. Их выявление надежное свидетельство текущей или недавно возникшей HAV-инфекции
- Анти-НАV IgG появляются позднее в сыворотке свидетельствуя о наличии HAV-инфекции и в дальнейшем о формировании иммунитета. Может быть использован для оценки эффективности вакцинопрофилактики или как маркер перенесенной инфекции.
-
2. Маркеры вирусного гепатита В (HBV)
- НВsAg - поверхностный антиген гепатита В, появляется в конечной стадии инкубационнго периода, через 4 недели после заражения сохраняясь 2-8 недель, исчезая в течении 3-6месяцев. Обнаружение поверхностного антигена вируса гепатита В в крови дольше 6 месяцев после начала болезни свидетельствует о возможной хронизации процесса. Возможно пожизненное носительство HBsAg. HBsAg способен активизировать клеточные протоонкогены. Через достаточно длительный срок (более 20 лет) возможно развитие гепатокарциномы. Не определяется в 10% случаев острой инфекции, в большинстве случаев хронических персистирующих гепатитов и внепеченочных формах HBV.
Положительный результат:
- острый гепатит В: инкубационный или острый периоды;
- носительство вируса гепатита В;
- хронический гепатит В.
Отрицательный результат:
- гепатит B не выявлен (в отсутствие anti-HBc-маркёров гепатита В);
- нельзя исключить острый гепатит В: период выздоровления;
- нельзя исключить хронический гепатит В низкой интенсивностью репликации;
- молниеносное, злокачественное течение ВГВ;
- нельзя исключить гепатит В с дефектным (серонегативным) HBs-антигеном;
- микст-гепатит В+D (дельта-вирус использует поверхностный антиген в качестве своей оболочки, поэтому он может не определяться).
Повышение уровня:
- успешная вакцинация против гепатита В;
- острый гепатит В - фаза выздоровления;
- хронический гепатит В с низкой инфекционностью.
Низкий уровень антител или в пределах допустимых значений:
- эффект вакцинации не достигнут;
- отсутствие перенесённого гепатита В в прошлом (при отсутствии других маркеров гепатита В);
- нельзя исключить острый гепатит В - инкубационный или острый периоды;
- нельзя исключить хронический гепатит В с высокой инфекционностью;
- нельзя исключить носительство HBs-антигена с низкой репликацией.
Отрицательный результат:
- гепатит B не выявлен (в отсутствие anti-HBc- маркеров гепатита В);
- нельзя исключить острый гепатит В: периоды инкубационный и выздоровления;
- нельзя исключить хронический гепатит В.
- Анти- НвcorIgG, свидетельствует о перенесенной инфекции (циркулируют пожизненно). Наличие в крови человека Анти-HBcor IgG говорит о наличии иммунитета к вирусу гепатита В в результате перенесённой в прошлом инфекции или вакцинации против этого вируса.
- НВeAg – маркер активной репликации вируса гепатита B (HBV). Обнаруживается в крови в период вирусемии, параллельно с HBsAg, начиная с конца инкубационного периода. В крови циркулирует недолго, меньше, чем HBsAg, исчезает к концу желтушного периода (примерно к 9 неделе с начала болезни). Циркуляция антигена инфекционности в течение 2 месяцев и более является признаком хронизации гепатита В. Таким образом, этот показатель может служить маркером контагиозности хронических НВsAg - носителей. При хроническом ВГВ с высокой репликативной активностью возможно обнаружение его в течение нескольких лет. Этот антиген циркулирует только в присутствии HBsAg, поэтому целесообразно обследовать именно HBsAg-позитивные сыворотки.
Положительно:
- острый или хронический гепатит с высокой интенсивностью репликации.
- острый или хронический гепатит с низкой интенсивностью репликации;
- острый гепатит: период инкубации или выздоровления;
- гепатит B не выявлен (в отсутствие других маркёров гепатита В).
- Анти- Нве - свидетельство перенесённого острого гепатита В, показатель ремиссии. Определяет присутствие антител к HBеAg. Синтез антител к HBeAg в организме свидетельствуют о прекращении репликации (размножения) вируса в организме. К концу 9-й недели эти антитела можно обнаружить у 90% больных. В период выздоровления эти антитела могут исчезать. Однако обнаружение анти-HBe не всегда является показателем отсутствия инфекционности данной конкретной сыворотки. Иногда возможно появление мутантной, дефектной HBeAg-отрицательной формы вируса, т. е. вирус данный антиген синтезировать не способен. Но при этом хотя в крови обнаруживаются анти-HBe, высокая репликативная активность вируса сохраняется.
Положительный результат:
- острый гепатит В: фаза выздоровления;
- хронический гепатит В;
- хроническое бессимптомное носительство вируса гепатита В.
Отрицательный результат:
- при отсутствии предшествующей инфекции вирусом гепатита В;
- невозможность исключения острого гепатита В - инкубационный или острый периоды;
- невозможность исключения хронического гепатита В;
- невозможность исключения носительства HBs-антигена с низкой репликацией.
ПРИ ХРОНИЧЕСКИХ ВИРУСНЫХ ЗАБОЛЕВАНИЯХ ПЕЧЕНИ ВЫЯВЛЯЮТСЯ ТРИ ФОРМЫ ВЗАИМООТНОШЕНИЯ С ВИРУСОМ ГЕПАТИТА В:
1. Обнаружение Анти-НВs - характерно для остаточных явлений перенесенного гепатита В и развивающего иммунитета.
2. Выявление НВsAg и Анти- Нве характерно для персистенции вирусного гепатита В.
3. Обнаружение НВeAg, Анти- НвcIgM и НВsAg характерно для репликации вирусного гепатита .
МАРКЕРЫ
ИНТЕРПРЕТАЦИЯ
HBsAg
HBeAg
Анти-HBcorIgM
Анти-HBe
Анти - HBs
+
+
+
-
-
Острый гепатит В
+
-
-
+/-
-
Носительство (низкая репликативная активность вируса)
+
+
-
-
-
Носительство (высокая репликативная активность вируса)
-
-
+/-
+
+/-
Реконвалесценция (ранний период)
-
-
-
-
+/-
Перенесенная в прошлом инфекция
-
-
-
-
-
Серологическое окно
-
-
-
-
+
Поствакционный иммунитет
3.Маркеры вирусного гепатита С (НСV)
- Анти-НСV – антитела к коровскому антигену вируса гепатита С. Показатель, характеризующий наличие антител (независимо от класса М и G) к вирусу гепатита C. Суммарный уровень антител (total) определяется с 4 - 5 недели после инфицирования и далее. Время появления anti-HCV различно: в одних случаях - через 4-5 недели после начала гепатита, в других - через месяцы после повышения уровня аминотрансфераз. У ряда больных с самоограничивающимся течением инфекции anti-HCV никогда не появляются. При положительном результате иммуноферментного анализа его повторят дважды. Однако в группах с низкой частотой носительства ложноположительных результатов оказывается слишком много. Среди лиц со сниженным иммунитетом (например, у больных на гемодиализе) доля ложноположительных результатов от общего числа положительных результатов составляет около 15% . Среди лиц с сохранным иммунитетом и частотой носительства менее 10% (доноры, военнослужащие, работники здравоохранения, больные венерологических лечебных учреждений) эта доля еще выше—в среднем 35% (по разным данным, от 15 до 60%). Следовательно, целиком полагаться на первичное определение нельзя. Это не более чем предварительный результат, который необходимо подтвердить более специфичным методом.
Подтверждающее определение – Иммуноблоттинг. Иммуноблоттинг проводят при положительном результате первичного определения. Результат иммуноблоттинга может быть положительным, отрицательным или сомнительным. В редких случаях антитела к вирусу гепатита C отсутствуют и у инфицированных. Это бывает до сероконверсии, то есть в первые 1—2 нед после заражения. Иногда сероконверсия наступает только через несколько месяцев, а у некоторых больных, прежде всего с ослабленным иммунитетом, антитела не вырабатываются на всем протяжении болезни. В таких случаях выявить инфекцию позволяет только определение вирусной РНК. Сомнительный результат бывает в периоде сероконверсии, изредка при хронической инфекции и чаще всего — у здоровых. При таком результате исследование повторяют через месяц или позже либо проводят определение вирусной РНК. Определение вирусной РНК проводят как для подтверждения результатов первичного выявления, так и для оценки эффективности лечения гепатита C. Выявление вирусной РНК всегда указывает на текущую инфекцию. Если результат первичного определения антител был положительным, а вирусной РНК не обнаружено, то общий результат исследования считается сомнительным.
При положительном результате антител показано дальнейшее обследование (повторное определение вирусной РНК, определение активности АлАТ). Вирусная РНК может не выявляться при остром гепатите C на фоне высокого уровня противовирусных антител, что не гарантирует ни от ее появления в дальнейшем, ни от перехода гепатита в хроническую форму. При хроническом гепатите вирусная РНК может обнаруживаться непостоянно.
Положительный результат:
- гепатит С или реконвалесценция после гепатита С. Нельзя различить острый и хронический гепатит, а также гепатит и реконвалесценцию.
Отрицательный результат:
- гепатит С не выявлен;
- первые 4 - 6 недель инкубационного периода гепатита С;
- гепатит С, серонегативный вариант.
-
Обнаружение в крови РНК (НСV) - является единственным критерием, характеризующим вирусемию, свидетельствующую о продолжающейся репликации вируса гепатита С. Определение вирусной РНК проводят как для подтверждения результатов первичного выявления, так и для оценки эффективности лечения гепатита C. Выявление вирусной РНК всегда указывает на текущую инфекцию. РНК вируса гепатита С выявляется в крови уже через 5 дней после инфицирования, т. е. задолго до появления антител к гепатиту С.
Вирусная РНК может не выявляться при остром гепатите C на фоне высокого уровня противовирусных антител, что не гарантирует ни от ее появления в дальнейшем, ни от перехода гепатита в хроническую форму. Вирусная РНК не выявляется и после перенесенной инфекции. При хроническом гепатите вирусная РНК может обнаруживаться непостоянно.
Таким образом, в отсутствие клинических данных отрицательный результат определения вирусной РНК не исключает инфекции. Клиническое значение такого результата не известно; дальнейшее обследование определяется результатами серологического исследования.
ПОСТАНОВКА ДИАГНОЗА ОСТРОГО ВИРУСНОГО ГЕПАТИТА:
- Гепатит А - диагностируется на основании выявления в сыворотке крови Анти-НАV IgM, или нарастания титра Анти-НАV- IgG
- Гепатит В - диагностируется при выявлении в сыворотке НВsAg , Анти- НвcIgM, HBeAg.
- Гепатит С - диагностируется по выявлению Анти-НСV, (НСV)-РНК
- Гепатит D - диагностируется на основании выявления Анти-НDV.
В лаборатории «Диагностик Пастер» исследования проводятся на современном оборудовании и реактивах мировых производителей. Сыворотки пациентов сохраняются
в замороженном виде в течение 3х месяцев.
Точная диагностика - гарантия эффективного лечения!
